Miopatia mitochondrialna z wadą transportu mitochondrialnego-białka czesc 4

Wyniki te wskazują na połączone niedobory kompleksów I do IV. Normalne ilości spektralnie wykrywalnego cytochromu b sugerują, że niedobór tego białka nie jest przyczyną niedoboru kompleksu III u tego pacjenta. Niski poziom aktywności dehydrogenazy bursztynianowej określony enzymatycznie odpowiada jego nieobecności na podstawie analizy histochemicznej. Analiza polipeptydowa łańcucha oddechowego
Complex I
Immunoblot z specyficzną dla holoenzymu i specyficzną dla podjednostki surowicą odpornościową do kompleksu mitochondrialnego I wykazał, że pacjent miał łagodne, ogólne zmniejszenie poziomów wszystkich reagujących krzyżowo polipeptydów (dane nie przedstawione). Nie stwierdzono zmian w pozornej masie cząsteczkowej podjednostki kompleksu I. Ilość transhydrogenazy dinukleotydowej pirydyny wydawała się zwiększona w mitochondriach mięśni pacjenta. Enzym ten jest blisko związany z kompleksem I na wewnętrznej błonie mitochondrialnej i często jest oczyszczany razem z kompleksem I. W konsekwencji, przeciwciała kompleksowe I haloenzymu często reagują krzyżowo z nim. Zwiększone poziomy transhydrogenazy obserwowano wcześniej w przypadkach niedoborów łańcucha oddechowego 3, ale znaczenie tej obserwacji dla leżącej u podłoża defektu biochemicznego jest niepewne. Immunoblot homogenatu mięśniowego z przeciwciałami Complex I ponownie wykazał łagodną, uogólnioną redukcję kompleksu I u naszego pacjenta, bez dowodów na akumulację jakiejkolwiek podjednostki w homogenacie (dane nie pokazane).
Complex II
Immunoblot w mitochondriach i homogenatach próbek mięśni od pacjenta z przeciwciałem dehydrogenazy bursztynianowej wykazał umiarkowaną redukcję flawoproteiny 72 kD, ale poważny niedobór białka Rieske 27,2 kD (dane nie pokazane). Przeciwciało dehydrogenazy bursztynianowej nie wykryło jednak żadnego z pozostałych trzech polipeptydów, które razem z dehydrogenazą bursztynianową tworzą Kompleks II.
Complex III
Figura 3. Figura 3. Immunobloty 100 .g mięśniochłonnych mitochondriów z kontroli, nasz pacjent (pacjent 1) i inny pacjent (pacjent 2) z przeciwciałem do haloenzymu kompleksu III i surowicy odpornościowej specyficznej dla podjednostki do żelazo-siarki Rieske a (Fe-S) Protein. Figura 4. Figura 4. Immunoblot 150 .g homogenatu mięśni i 150 .g białka mitochondrialnego z kontroli, nasz pacjent (pacjent 1) i inny pacjent (pacjent 2) z przeciwciałem swoistym dla żelaza Rieske-siarka (Fe-S ) Białko. Białka rozdzielano na 12% żelu z dodecylosiarczanem-poliakryloamidem.
Immunoblotowanie mitochondriów mięśniowych wykazało prawidłowe ilości białka rdzeniowego I i II, cytochromu C i podjednostki VI w mitochondriach pacjenta (ryc. 3). W tym preparacie przeciwciało specyficzne dla białka Rieske wytworzyło silne prążki odpowiadające polipeptydom o pozornych masach cząsteczkowych 26 i 22,5 kd i dalszym słabym paśmie tuż powyżej 22,5-kd polipeptydu w kontroli. U pacjenta jednak nie było pasma 26 kD, a prążek 22,5 kD był obecny w znacznie zmniejszonych ilościach. Eksperyment ten powtórzono w przypadku preparatów mitochondrialnych i homogenatów mięśniowych z użyciem przeciwciała swoistego dla białka Rieske (ryc
[podobne: szmer skurczowy, ból w lewej pachwinie u mężczyzn, nystatyna ulotka ]